复发性口腔溃疡患者口腔中的幽门螺杆菌

　　【摘　要】　目的：初步探讨复发性口腔溃疡(recurren t oral ulcer, ROU)患者的发病与其口腔中的幽门螺杆菌(helicobacter pylori,Hp)之间 的关系。方法：通过聚合酶链反应(polymer ase chain reaction, PCR)，对每位ROU患者口腔中6个不同牙位龈上、龈下共12份菌斑进行 检测，同时设立健康对照组，比较两组检测结果。结果：共检测ROU 患者72例，对照组94例；Hp阳性率分别为56.94%和28.72%，差异非常显著(P<0.01) ；且轻 型ROU患者Hp阳性率明显低于重型ROU患者(P<0.05)。结论：ROU 的发病与口腔中Hp感染可能有关，其致病机理尚待进一步研究。

　　　复发性口腔溃疡(recurrent oral ulcer, ROU)又名复发性阿弗他口炎(rec urrent aphthou s stomatitis, RAS)、复发性口疮(recurrent phthae)，是口腔粘膜病中最常见的一种。病 因目前尚不十分清楚，国内外学者虽然作了大量研究，提供了许多与该病有关的因素，但均 未得到充分的证实。本文通过对72例ROU患者口腔中不同牙位龈上、龈下菌斑进行Hp-PCR检 测，发现ROU的发病可能与Hp相关。

1　材料和方法

1.1　检测对象
　　分为ROU组和对照组。ROU组均按全国统编教材《口腔内科学》第三版标准进行诊断，共72例 ，男42例，女30例，年龄9～47岁。对照组为自愿受检者(非ROU患者)，共 94例，男55例，女39例，年龄10～52岁。条件控制：①所有受检者取样 前1周内未服用任何抗生素、铋剂、抗酸剂及H2受体拮抗剂，1月内未服用类固醇类药物 或非类固醇类抗炎药，如阿司匹林等；②所有受检者均不考虑是否为胃炎、胃溃疡等与Hp感 染有关的上消化道疾病患者，但须无严重全身性系统疾病，非Ⅱ度或Ⅱ度以上牙周炎患者； ③两组间年龄、性别、取样牙位和方法、患者牙周条件等可控制因素通过均衡检验，证实无 差异，具有可比性；④ROU患者按轻型ROU、重型ROU和疱疹样ROU分类，然后分别观察其Hp 阳性率检测结果的差别。
1.2　实验方法
　　所有受检者检测早晨均按指导刷牙，取样前用无菌生理盐水轻轻将口腔漱干净，然后刮取每 位受检者前牙、前磨牙、磨牙上、下颌各1个牙位，尽量取牙周情况较好的牙齿的龈上、龈 下共12份菌斑，置于无菌生理盐水的尖嘴离心管，-40℃保存备检。
　　将备检菌斑放入400μl无菌生理盐水溶液中离心12 000r/min×5min，弃上 清 ，加DNA裂解液50μl，蛋白酶K 2μl， 55℃孵育1h，100℃水浴10min，同时设置阳性模板 和阴性对照(Pacific Econ-Tech Co. USA PCR试剂盒)；15 000r/min×5min离心后，取5μ l进行PCR检测。取PCR扩增产物15μl，用15g/L琼脂糖凝胶 (含0.5g/L溴化乙锭)经TAE电泳缓冲液，电泳30min(电压5v/cm)后在紫外透射反射仪300nm下 观察结果，如果在200bp处出现橙黄色条带，则诊断为Hp阳性(+)；每一位受检者12份牙菌斑 中只要有1份Hp阳性，则该受检者口腔Hp检测结果统计为阳性。

2　结果

2.1　两组共166例1992份菌斑，检测结果见表1。由表可见，ROU组Hp感染阳性率明显高于对 照组(P<0.01)。

表1　两组Hp-PCR检测结果

组别	菌斑检测结果			总检测结果
	菌斑数	菌斑Hp阳性数	%	受检人数	菌斑Hp阳性数	%
ROU组	864	321	37.13	72	41	56.94
对照组	1128	93	8.24	94	27	28.72
合计	1992	414	20.78	166	68	40.96

2.2　各型ROU患者Hp检测结果见表2。由表可见，重型ROU患者与轻型ROU患者 Hp检测 结果亦有较为显著的差异(P<0.05)；Hp阳性率随着溃疡程度加重而升高。 表2　不同类型ROU患者Hp检测结果

3　讨论
　　Hp是公认的慢性活动性胃炎的致病菌，是消化性溃疡重要的致病因子，并与胃癌及胃粘膜相 关的恶性淋巴瘤密切相关［1］。随着Hp在牙菌斑上不断发现［2，3］，它对 口 腔粘膜病、牙周炎、干槽症等一些病因尚不清楚的口腔疾病的作用一直是热门课题。早在80 年代末期，许多人就进行了RAS与上消化道疾病关系的研究，认为它们之间关系密切。但199 7年Porter等通过RAS及其它口腔疾病Hp血清IgG抗体水平比较，认为Hp在RAS及其它口 腔疾病中作用不大，但他们仅通过Hp血清IgG抗体的定性研究，未对其进行定量测定，因此 不能否定Hp与RAS等口腔疾病的关系。许国琪、张水龙、唐国瑶等通过一系列研究发现，口 腔 粘膜扁平苔癣(OLP)的发病与Hp密切相关［4］，提出抗幽门螺杆菌治疗是治疗OLP的 一种有效方法［5］，并对其疗效进行了分析，认为Hp是引发OLP的一个重要而又直 接的原因［6］。这表明Hp与OLP有着密不可分的联系。