表3　不同龋敏感性儿童唾液中酶活性和总蛋白含量比较（±s）

3　讨　　论

　　实验结果显示儿童菌斑中3种蛋白水解酶活性均可测到，唾液中仅能测到DPPIV与TLP，且活性较低，相关性分析也表明两者之间无明显关系，初步说明菌斑中蛋白水解酶可能主要来源于菌斑中细菌，唾液来源比例较小。但考虑到:①唾液和菌斑样本处理方式不同,唾液的直接离心所测均为胞外蛋白酶，菌斑稀释液的匀浆可能使菌细胞破碎，释出胞内蛋白酶，其比例虽小于胞外者［3］，由于酶活性本身很低，这小部分胞内来源者也可能对差异产生较大影响；②龈沟液来源的蛋白水解酶的影响，如老年根面菌斑中TLP即有较大部分来源于龈沟液；③唾液和菌斑的组成受个体生理条件和外界多种因素影响，酶的产生和活性均具有较大的变动性等；④产生酶的细菌、组织及其影响因素等尚不完全清楚。对唾液和菌斑中酶的来源和活性仍需进一步的研究。
　　唾液中未测得LAP活性，可能原因为：①唾液成分及其可产生酶的微生物组成受口腔局部因素、机体整体生理活动及病理状态影响较大，稳定性很差，波动性很强，个体间因而存在较大差异［4］。本研究所选样本含量较小，可能有较明显的选择性偏倚；②受检者唾液中产生该酶的细菌(乳酸杆菌、缓症链球菌、米勒链球菌等)含量少或其口腔局部环境不适宜LAP的产生；③酶活性与口腔局部生理情况密切相关，有时酶活性低，在测量时需延长孵育时间至24 h才可测得［5］，本实验仅孵育30 min，唾液内低活性的LAP可能未及显示实验已中止，导致结果阴性。④一些不溶性或大分子量的蛋白水解酶可能以颗粒形式或与唾液成分结合存在而不出现于唾液离心上清液，Grenier等［6］曾报道大约55％的人唾液蛋白水解酶活性存在于离心后的颗粒沉淀中。LAP可能也属此种情况。
　　本研究结果显示唾液与菌斑中蛋白含量不相关，这主要由于菌斑中的蛋白质含量受龈沟液的影响大，而受唾液影响小［7］。此外，不同性别、不同龋敏感性儿童唾液中蛋白水解酶活性无差异也表明，3种蛋白水解酶的变化与性别、龋齿数无关。

本课题为国家自然科学基金资助项目（编号 39000104）

作者单位:610041　华西医科大学口腔医学院(齐　雪现在上海市第六人民医院)

4　参考文献

1　周学东,齐　雪,张静仪,等.乳牙菌斑中蛋白水解酶与乳牙龋关系的初步研究.华西口腔医学杂志,1999,17(4):367～368
2　周学东，米方林，张静仪,等.不同部位菌斑蛋白水解酶活性的分析比较.华西口腔医学杂志，1998，16(4):339～341
3　Edgar WM, O'Mullane DM. Saliva and Oral Health. 2nd ed, Margate: Thanet Press Limited, 1996:2
4　Ingman T, Sorsa T, Lindy O, et al. Multiple forms of gelatinases Type Ⅳ collagenases in saliva and gingival are vicular fluid of periodontites patients. J Clin Periodontol, 1994, 21(1):26～31
5　Setsuko Sato, Koga T, Inoue M. Degradation of the microbial and salivary components participation in human dental plaque formation by proteases elaborated by plaque bacteria. Arch Oral Biol, 1983, 28(3):211～216
6　Grenier D, Mayrand D. Functional characterization of extracellular vesicles produced by bacteroides gingivalis. Infect Immun, 1987, 55(1):111～117
7　肖晓蓉. 口腔微生物学及实用技术. 北京:北京医科大学*中国协和医科大学联合出版社, 1993:149

责任编辑：姚红祥