图1　正常对照组

　　9周组：毛细血管网未见明显变化，其密度稍有增加，但不明显，个别部位微血管直径略有增加(5～10 μm)，并发出散在的尖锥型新生毛细血管芽(图2)。

图2　9周组

　　12周组：基本保留了正常组织内微血管空间排布特征。毛细血管排列比较规则，但直径增粗(11～20 μm)，血管发生弯曲，有较多尖锥型或圆突型新生毛细血管芽形成。增生上皮的基底部血管开始出现似“竹笋”样新生，血管芽呈尖锥样，血管密度明显增加。其下微血管有迂曲现象，管径增粗至25～35 μm(图3)。

图3　12周组

　　15周组：微血管构筑发生明显改变，毛细血管网变得不规则，出现狭窄、扭曲及扩张的毛细血管，毛细血管增生变密成团块状集中。微血管管扩张(35～55 μm),小血管增粗(35～60 μm)(图4)。

图4　15周组微血管变化

　　18周组：毛细血管网变得完全不规则，杂乱无章。肿瘤内不同区域内可见稠密的、呈团块状的各种类型的新生血管，形态各异，扭曲囊状扩张，盘旋，窦腔血管多见。囊腔血管外形极不规则，可见多数囊状膨出，周围有大量形态各异的细小血管包绕。微血管相互反复吻合，可见自身血管袢及盲端血管。一些区域出现铸型剂外漏现象。微静脉也发生圆突状及囊球状新生血管芽。微血管在行径途中形成囊球状膨大，并可见长形而无分枝的微血管，直径5 μm，微动脉、小静脉及小动脉进一步扩张(直径65～80 μm)、迂曲(图5)。

图5　18周组，微血管间相互反复吻合，可见自身血管袢。

　　21周组：周边区血管生长旺盛，中心区血管增生相对减弱，出现无铸型空间，血管畸形和18周组相似，肿瘤基底部可见血管间存在囊状吻合。肿瘤实质内可见动静脉短路。毛细血管被拉伸。部分区域存在较成熟的毛细血管网，表现为排列相对规则，形态一致，直径均一，相互间存在大量吻合，肿瘤中心区无铸型的空间不规则，周围可见伸长变细的毛细血管，新生毛细血管芽及畸形血管多见。树脂外漏在表面及实质内均可见到(图6，7)，微动静脉进一步扩张(80～100 μm)，肿瘤外周较大的血管也发生了变化(直径约450 μm)。

图6　21周组，小静脉内皮细胞核印迹增大。

图7　21周组，肿瘤内部分区域存在较成熟的毛细血管网。

3　讨　论
　　对正常组织微血管的研究表明，微循环在组织的独特功能方面起重要作用，其形态特征和空间排布与更有利于功能相适应，血管以更有效地输送氧及营养物质的方式排列的〔2,3〕。以往对肿瘤血管的形态及空间排布的研究均是采用在透明窗中对移植瘤的研究，但透明窗只允许移植瘤侧向生长，压迫肿瘤而影响了肿瘤的大小。而且，移植瘤远离原发组织，肿瘤细胞株也经过了多次传代，因此，其血管形态及增生情况和原发肿瘤有明显的差别。本实验采用化学致癌剂加局部刺激诱发了金黄地鼠舌癌模型，其组织来源和发病部位一致，肿瘤生长空间及微环境均和自然状态下发生的舌癌基本一致。
　　微血管铸型由于其铸型剂具有较低的粘性，能可靠地铸型最小的微血管，从而能很好地研究微血管的空间排布及结构特征。从实验结果看，舌部正常粘膜的微血管形成“花蓝状”或“梅花瓣”样的血管袢，低倍镜下呈鱼网状，微动脉间相互吻合。深部肌层的毛细血管为一些直径约6 μm的毛细血管，排列均匀，血管表面光滑，但稍迂曲，这和颊囊的微血管构筑明显不同〔4〕。这可能和舌的功能相适应。舌为具有运动功能的肌性器官，迂曲的肌层微血管和运动相适应，而舌部特殊的血管构筑说明了舌具有更丰富的血供。
　　在单纯上皮增生期，即已出现毛细血管增生现象，进入癌前病变恶性转化时期(轻—中度上皮异常增生)，增生上皮的基底部即出现“竹笋”样的血管芽，血管密度明显增加，毛细血管直径增粗、扩张、迂曲并可见锥型和圆突型新生血管芽。进入原位癌阶段，毛细血管进一步增生，大量扭曲、扩张，并密集成团，其下微血管也发生增生现象。发展至浸润癌时，血管生成反应更加强烈，毛细血管增生形成各种畸形血管，微血管及小血管扩张、弯曲。这和金黄地鼠舌癌血管生成的组织学定量研究结果一致。这些结果提示了在舌癌形成的动态过程中，血管生成有三个明显的阶段：在最初阶段，增生的上皮组织是由原来存在的宿主血管供养的，随着上皮增生恶性程度的加重，这些血管发生改变，表现为血管直径增粗、扭曲、扩张，并出现新生血管芽，但基本结构和正常宿主血管床相似。随着癌变开始，肿瘤组织诱发了大量的血管生成。这些新生血管在形态学及空间排布上和宿主的微血管具有明显不同，呈现出特征性的肿瘤诱发微血管。这和Skinner〔5〕等的研究结果相一致。

责任编辑：姚红祥