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〔摘要〕 目的：探讨血管内皮细胞与三叉神经脱髓鞘病变的关系，为临床解释脱髓鞘病因发生提供依据。方法：分别选用描写、轻度、中度、脱髓鞘组进行免疫组化表达，对内皮细胞、淋巴细胞在病变处分布变化进行定量分析。结果：CD31、F8的表达证实病变处血管内皮细胞突起和塌陷。CD3、CD45RA表达病变均有淋巴细胞参与。描写、轻度组与中度、脱髓鞘组的血管内皮细胞与淋巴细胞计数相比较，差异显著(P<0.05或P<0.01)。结论：血管内皮细胞在脱髓鞘病变中，可激活淋巴细胞，也可输送淋巴细胞参与免疫应答。因此，阻止内皮细胞的病变具有重要意义。
关键词 神经组织；脱髓鞘疾病；血管内皮；免疫组织化学
内皮细胞(endothelial cells,EC)具有多种功能，它可分泌多种细胞因子并参与免疫应答。近几年来，对于它在三叉神经脱髓鞘中的免疫功用，已越来越引起人们的关注〔1，2〕，对于EC释放细胞因子破坏髓鞘的过程目前还没有明确结论。EC在脱髓鞘的免疫反应中的作用是肯定的。本文就EC在脱髓过程中的一些免疫病理现象作一探讨，并对其它变化加以讨论。
1 材料和方法
1.1 材料
50例三叉神经脱髓鞘标本，为本院1997年入院治疗的三叉神经痛切除术病例，其中男性32例，女性18例。年龄45～65岁，平均54.5岁。标本经体积分数为10%福尔马林固定24 h。取材沿神经纵轴方向，长度为1 cm的神经组织2～3条，取横切面4～6个。
1.2 病理资料
50例三叉神经脱髓鞘病变病例均经常规石蜡切片，HE染色。以病理诊断为依据(其中不能明确结论，以描写形式诊断组11例，轻度水肿伴轻度脱髓鞘病变组14例；轻度炎症伴中度脱髓鞘病变组12例，脱髓鞘病变组13例)。
1.3 试剂和染色
试剂CD31、CD45RA、CD3、第八因子(factor Ⅷ related antigen,F8)、生物素化兔抗鼠、ABC复合物(均为Dako公司产品)。染色采用免疫酶标ABC法。分别用淋巴结作为阳性对照和阴性对照。
1.4 判断与分析
在40倍显微镜下观察被染色细胞及血管着色的阳性程度，细胞浆着色呈浅棕色者为(+)；棕色者阳性(++)；深棕色者(+++)；与背景不能分辨者(—)。对每例病例的病变处随机观察20个视野，血管壁的内皮细胞及淋巴细胞浸润情况分别计数，累计积分(计数标准如下：以血管内皮细胞突起或塌陷，CD31、F8两者染色均为阳性为准；淋巴细胞浸润血管壁或镶嵌在内皮细胞CD3、CD45RA染色阳性为准)。
1.5 统计学处理
采用多组秩t检验和方差分析。
2 结 果
2.1 CD45RA、CD3和CD31、F8在病变的三叉神经组织中分布
CD45RA、CD3所标记的淋巴细胞可广泛分布在病变的神经组织内，其特点为：(1)沿血管壁分布及浸润(图 1)；(2) 神经纤维束间分布；(3)神经外膜分布。CD31、F8所标记血管EC均为棕色，可见病变的血管EC呈肿胀，部分EC突起、塌陷及淋巴细胞浸润(图2)，炎症区域的淋巴细胞计数增加，EC的表达增强。
图1 淋巴细胞沿血管壁分布、浸润。CD3表达淋巴细胞呈阳性 ×40 ABC法
图2 淋巴细胞镶嵌在塌陷的内皮细胞间隙。F8表达内皮
细胞呈阳性 ×40 ABC法
2.2 各组间血管EC病变和淋巴细胞计数
各组间的变化不一(表1)。统计结果表明，描写组、轻度组与中度组、脱髓鞘组的病变EC和淋巴细胞计数相比较，差异显著(P<0.05或P<0.01)。轻度组的病变EC与描写组相比较，有显著差异(P<0.05或P<0.01)。描写组与轻度组的淋巴细胞计数相比，有显著差异(P<0.05或P<0.01)。
表1 各病变组的EC和淋巴细胞计数(%， ±s)
| 分组 |
例数 |
EC数 |
淋巴细胞数 |
| 描写 |
11 |
2.8±0.3* |
4.8±0.8* |
| 轻度 |
14 |
3.4±0.7* |
4.0±0.5* |
| 中度 |
12 |
2.2±0.3 |
3.1±0.2 |
| 脱髓鞘 |
13 |
2.3±0.7 |
3.2±0.5 |
注：*与中度组、脱髓鞘组比较，
3 讨 论
EC具有多种特性，正常情况下的EC与毛细血管形成一种不间断的封闭带，可阻止半径大于2.5 nm的分子通过。炎症发生时，EC与毛细血管形成的间隙扩大，较大颗粒(如白细胞等)即可通过。在脱髓鞘病变的过程中，当EC受到淋巴细胞刺激时，EC激活突起，增生肿胀并分泌一系列细胞因子，如白介素、细胞趋化因子等。活跃的EC其CD31、F8表达增强，细胞间隙扩大，引诱或粘附淋巴细胞穿越毛细血管基底膜进入组织间隙〔3，4〕，引发神经组织的一系列变化及免疫应答。在本实验中，炎症水肿区的EC常常是CD31和F8表达增强并伴有淋巴细胞浸润，浸润的淋巴细胞是以T、B细胞为主的，其CD3、CD45RA的表达的阳性结果均证实这一点。EC的突起或塌陷、淋巴细胞粘附使免疫反应增强，加重和加速脱髓鞘病变。在已形成病变区域，淋巴细胞较少，EC的突起数量明显少于病变初期。而在早期病变时，淋巴细胞往往多于病变中期，EC的突起或塌陷则在病变即将形成时出现。结果表明，炎症的形成和加重与EC的起动有直接关系，而病变形成后，EC的减少可能是处于“休止”状态，一旦有新的刺激，就可出现反应，这种反复的刺激，使得病变不断加深，引发脱髓鞘发生、发展〔5，6〕。在脱髓鞘过程中，EC和淋巴细胞具有双重身分，淋巴细胞可激活EC，EC也可粘附淋巴细胞参与免疫反应，使病变加重。
责任编辑：姚红祥 |