[摘要]  目的  对将使用于义齿磁性固位体的两种特殊不锈钢(S1与S2)的生物安全性进行初步检测，评价其临床应用的生物相容性。方法  用纯钛及钴铬合金作比较，通过将材料浸提液与体外培养的L—929细胞接触培养，进行细胞的形态学观察及二甲基噻唑二苯基四唑溴盐(MTT)比色，评价材料对细胞造成的毒性损害程度。结果  细胞的形态学观察显示，随着培养天数的增加，阳性对照组中的脱落细胞、死亡细胞逐渐增多。其余各组细胞大部分继续贴壁生长。细胞密度增加。MIT比色法结果显示，非磁性不锈钢(S1)和磁性不锈钢(S2)浸提液对细胞有轻微的毒性，细胞相对增殖率(RGR)降低3％，钴铬合金对细胞表现出1级细胞毒性，RGR降低11％，但4种金属材料组与阴性对照组的吸光度值之间的差异均克统计学意义(P>0．05)。结论  S1、S2两种不锈钢仅具有极微弱的细胞毒性，符合临床应用的要求。
【关键词】  义齿；磁性附着体；细胞毒性
    磁性固位体由于其特殊的固体原理而越来越多地被应用于全口义齿、覆盖义齿、种植义齿及颌面赝复体等修复中，本实验通过体外培养细胞的形态学观察及二甲基噻唑二苯基四唑溴盐(MTT)比色法「1」，对在义齿磁性固体中将使用的两种特殊不锈钢的生物相容性进行初步检测，并与口腔科常用的钴铬合金、纯钛的生物相容性进行比较，评价两种特殊不锈钢的生物安全性。
1　　材料与方法
1．1  实验试样分组及来源
    A组：非磁性不锈钢(S1)；B组：磁性不锈钢(S2，中国科学院沈阳金属研究所)；C组：纯钛(日本松风公司)；D组：钴—铬合金(贺利氏古莎齿科有限公司)；E组：PVC材料阳性对照组(沈阳化工集团永新有限公司)；F组：RPMl　l640液阴性对照组。实验用细胞株选用对数生长期的L—929细胞。
1．2实验材料及设备
    RPMl　l640培养基(Serva，Germany，含10％胎牛血清，青霉素100 U／ml，链霉素100ug／ml，pH=7．2)，MTT(Biotec，Sino—AmeriCan)，使用前新鲜配制，过滤除菌，浓度为5 g／L.二甲基亚砜(DMSO)。C02培养箱(D—63450，Heraeus，Germany)，倒置相差显微镜(CK—40，Olympus，Japan)，自动酶标测试仪(ELx-800，biO-Tek instruments，Inc，American)，24孔和96孔培养板(NuNcTM，Denmark)。
1．3  实验方法
    试样浸提液与细胞悬液的制备：将A—E组材料制成长、宽、厚度分别为10、9、3 mm的长方体，灭菌后置于24孔培养板中，按浸提液与试样表面积之比为0．55ml／cm2的比例加入RPMl l640培养液，置于37℃、95％相对湿度、5％C02培养箱中72h，得到材料浸提液。选取快速生长期的L—929细胞，用RPMl l640液调制成细胞密度约为1．0X105个／ml的细胞悬液，备用。
     浸提液与细胞接种培养及结果观察：取96孔培养板，每板均选出6组孔，加入细胞悬液100 ul，培养24 h。在1—5组孔中分别加入A-E组的材料浸提液100 ul，在第6组孔中加入RPMl 1640培养液100 ul后继续培养。分别于培养后的1、2、3、4、5 d各取一块培养板，在倒置相差显微镜下观察活细胞的形态并摄影。在培养孔中加入5 g／L的MTF液，每孔 20 ul，继续培养4 h后，吸出孔内培养液，用PBS液振荡洗涤3次，每孔中再加入DMSO 150 ul，微振荡20 min后，用自动酶标仪检测吸光度值(A)，实验波长选为490 nm。
    实验数据分析：计算细胞相对增殖率(RGR)，并参照六级毒性评级标准作毒性级评定「2」，RGR(％)：(实验组的A／阴性对照组的A)X100％。用SPSS软件，将各实验组的吸光度值作方差分析和均数间两两比较的统计学分析。

图1  培养1 d后PVC材料组L—929细胞生长情况(倒置显微镜  x 200)

图3  培养5d后PVC材料组L—929细胞生长情况(倒置显微镜  x200)

责任编辑：姚红祥