[摘要] 目的:观察五味子浸出液的防龋效果。方法:体外试验观察五味子浸出液对变形链球菌生长、产酸、粘附的抑制情况;临床实验观察五味子液漱口对菌斑形成的影响。结果:当五味子浸出液的浓度为10%(w/v)时,变形链球菌的生长较对照组减少65.41%;细菌粘附率下降11.63%;pH值则升高1.51。50%(w/v)五味子液漱口,4h,24h菌斑指数分别较对照组低0.47、0.83。结论:五味子浸出液有一定的防龋效果。
[关键词] 五味子浸出液; 变形链球菌菌斑
变形链球菌(简称变链菌)与龋病的关系已得到口腔界的公认。我们在筛选防龋中草药时发现五味子变链菌有一定的抑制作用。为了探讨其防龋效果,我们通过体外试验观察五味子煎剂对变链菌(Ingbrittc)生长,产酸、粘附的影响,临床试验观察五味子漱口控制菌斑形成的效果,为其用于防龋提供依据。
材料与方法
1. 五味子煎剂的制备 取五味子100g,洗净,加水1000ml,文火煎至100ml,过滤,离心3次,消毒备试。
2. 五味子液抑制变链菌生长产酸试验 取消毒试管20支,分4组,每组编1-5号,每管中加入牛心脑浸出液培养基(BHI pH 7.2)4ml 106CFU/ml(麦氏浊度计比色法)变链菌液0.4ml,然后每组1号管中加入五味子原液0.4ml,2、3、4号管中各加入按经典方法稀释的五味子液0.4ml,5号管中不加药液以备对照,厌氧培养18h后离心,上清液用SA-720酸度计测pH值以观察药物对变链菌产酸的影响;管底沉淀物加3ml生理盐水混匀后用uv-265紫外分光光度计测OD值以观察药物抑制变链菌生长的效果,同法重复试验2次,分别计算每组同号试管pH值、OD值的均值及标准差。
3. 五味子液抑制变链菌粘附试验 试管、培养基、药液、菌液准备同每管中插入已灭菌的0.8mm牙用不锈钢丝一根,厌氧培养48h后取出铜丝,将附着于钢丝上的细菌刮入盛有3ml生理盐水的试管中,培养液离心后去上清液,管底沉淀物加3ml生理盐水分别测OD值,按照公式(附着菌OD值)/(附着菌OD值+未附着OD值)×100%求出附着百分率。
4. 五味子液抑制菌斑形成的临床试验 (1) 受试对象及药物:选择牙列完整、排列整齐,受试前3个月内及实验期间未使用抗生素的在校学生10人,分4次分别使用蒸馏水(阴性对照 1号),25%五味子液(2号),50%五味子液(试验液3号),0.2%洗必太液(4号阳性对照)。所有液体临试验前由专人用调色剂和矫味剂进行处理,使其外观和口感基本一致,资料统计后揭密。(2) 试验方法:受试者每次试验前洁牙,使受试牙面菌斑指数(PLI)降为零。洁牙后即给予50ml漱口液,分3次漱口,每次含漱时间不少于1min,停止刷牙24h。分别于漱口后4h,24h用碱性品红染色,采用改良的Qingley-Hein方法[2]记录16、21、24,36、41、44菌斑指数,恢复刷牙。各牙菌斑指数相加除牙数求出受试者平均菌斑指数。以后每间隔2周分别使用2、3、4号液同法进行试验。
结 果
表1 五味子液抑制变链菌生长方差统计
药物浓度% (w/v) | OD(±s) | P 值 | ||
与对照组比较 | 组内梯度比较 | |||
10 | 0.717±0.074 | <0.01 | 10:5 | >0.05 |
5 | 0.841±0.103 | <0.01 | 10:2.5 | <0.01 |
2.5 | 1.208±0.068 | <0.01 | 10:1.25 | <0.01 |
1.25 | 1.805±0.149 | >0.05 | 5:2.5 | <0.05 |
5:1.25 | <0.01 | |||
对照组 | 2.073±0.944 | 2.5:1.25 | >0.05 |
五味子液抑制变链菌生长结果见表1。五味子液抑制变链菌产酸结果见表2。五味子液抑制变链菌粘附结果见表3。五味子液抑制菌斑形成结果见表4。 表2 五味子液抑制变链菌产酸的方差统计 |
药物浓度% (w/v) | OD(±s) | P 值 | ||
与对照组比较 | 组内梯度比较 | |||
10 | 5.77±0.14 | <0.01 | 10:5 | <0.05 |
5 | 5.32±0.27 | <0.01 | 10:2.5 | <0.01 |
2.5 | 5.14±0.22 | <0.01 | 10:1.25 | <0.01 |
1.25 | 4.54±0.38 | >0.05 | 5:2.5 | <0.05 |
5:1.25 | <0.01 | |||
对照组 | 4.26±0.19 | 2.5:1.25 | >0.05 |