〔摘要〕 目的：研究PCNA、P53在舌癌中表达的相关性及与肿瘤病理分级、淋巴结转移、预后的关系。方法：应用免疫组化SP法，观察46例病理确诊的舌癌石蜡标本中PCNA指数及P53阳性率的表达。结果：PCNA在所有病例均有不同程度表达，46例中28例呈P53阳性表达(60.9%)。P53阳性组中PCNA指数明显高于P53阴性组(P<0.001)。PCNA指数随舌癌病理分级的升高而增加(P<0.025)。P53阳性率在Ⅱ、Ⅲ级舌癌明显高于Ⅰ级舌癌(P<0.05)。在有淋巴结转移及术后生存小于3年组中PCNA指数及P53阳性率均明显高于无淋巴结转移及术后生存3年以上组(P<0.001,P<0.05)。结论：联合检测PCNA及P53对判断舌癌恶性度，预测淋巴结转移趋势和预后及指导临床治疗有重要价值。
关键词 增殖细胞核抗原；p53基因；舌；肿瘤
近年来研究证实增殖细胞核抗原(PCNA)的表达可反映细胞增殖活性，是判断细胞增殖状态的重要指标，与肿瘤恶性度及预后有关。抑癌基因P53的突变与人类多肿瘤的发生发展密切相关。舌癌在口腔鳞癌中属于恶性度高、淋巴转移早、预后不良的一种。为此，作者应用免疫组化SP法对舌癌PCNA及P53的表达进行了研究，旨在探讨两者表达的相关性及与肿瘤病理分级、淋巴结转移及预后的关系，为临床治疗提供一定依据。
1 材料和方法
1.1 材料
标本来自广东医学院附属医院口腔科1988～1995 年术后存档石蜡标本，共计46例。其中，男性32例，女性14例，年龄24～71岁，平均48.6岁。肿瘤部位：舌缘22例，舌尖11例，舌腹10例，舌根3例。所有标本均再次复查、确诊，46例均为鳞状细胞癌。按WHO标准病理分级：Ⅰ级18例，Ⅱ级12例，Ⅲ级16例。全组病例术前均未行放疗或化疗，手术采取舌颌颈联合根治术，术后经病理确诊有颌下或(和)颈部淋巴结转移17例，占36.96%。术后失访8例，随访38例中，生存3年以上26例(68.4%)，术后1～3年内死亡12例(31.6%)。
1.2 方法
标本按4 μm厚连续切片，分别行HE染色及PCNA、P53免疫组化染色。免疫组化试剂盒购自美国Maxim公司，操作按说明书进行，以PBS代替一抗作阴性对照。
1.3 结果判定
PCNA及P53均以细胞核呈清晰棕色为阳性细胞，采用测试网格，每例随机选取10个高倍视野(×400)计数1000个肿瘤细胞内阳性细胞所占比例。PCNA表示为阳性细胞指数，P53以阳性细胞>5%定为染色阳性。
1.4 统计分析
采用t检验及χ2检验。
2 结 果
2.1 PCNA及P53基因表达分布
46例中PCNA均有不同程度表达，阳性细胞指数9.1%～87,2%，平均(42.31±22.11)%(±s)。阳性细胞在舌癌高分化区主要分布在癌巢周缘，胞核形态较一致，染色较浅(图 1)。在低分化及癌组织侵袭区，阳性细胞弥散分布，胞核大小不一，染色较重(图 2)。46 例中，P53阳性表达 28 例，阳性率 60.9%。阳性细胞分布情况与 PCNA 基本一致(图 3)， 但阳性细胞平均指数较PCNA低。
图1 PCNA在高分化舌癌中的 表达(×200)
图2 PCNA在低分化舌癌中的 表达(×200)
图3 P53在高分化舌癌中的 表达(×400)
2.2 PCNA、P53表达与舌癌病理分级、淋巴结转移及预后的关系 见表1。
表1 PCNA、P53表达与舌癌病理分级，淋巴结转移及预后的关系
| 项目 | 例数 | PCNA指数 (  ±s)% | P值 | P53染色 | P值 | |
| + | - | |||||
| 病理分级 | ||||||
| Ⅰ | 18 | 27.85±14.29 | 6 | 12③ | ||
| Ⅱ | 12 | 40.32±18.19① | 9 | 3 | ||
| Ⅲ | 16 | 60.07±20.06② | 13 | 3 | ||
| 淋巴结转移 | ||||||
| 有 | 17 | 56.85±20.25 | 14 | 3 | ||
| <0.001 | <0.05 | |||||
| 无 | 29 | 33.79±18.65 | 14 | 15 | ||
| 预 后 | ||||||
| >3年 | 26 | 31.31±15.92 | 12 | 14 | ||
| <0.001 | <0.05 | |||||
| <3年 | 12 | 60.28±20.15 | 10 | 2 | ||
