顺铂—白蛋白微球狗舌动脉灌注后的药物释放特性研究

　　提　要　本实验对CDDP—AMS犬舌动脉栓塞后的药效学进行了研究，发现微球在体内具有缓释作用，起到药物贮存站（deport）的作用，结合血管密度的改变结果，较直接而具体地解释了产生CDDP—AMS栓塞治疗临床效果的机理，认为其效果是通过局部较长时间持续的CDDP释放对肿瘤的杀伤作用和血流阻断后肿瘤组织缺氧、缺血、坏死的协同迭加作用，从而为临床更广泛应用这一技术提供了实验数据。
　　关键词　顺铂—白蛋白微球　狗舌动脉栓塞　药动学　缓释

材料与方法

　　实验动物及分组　选用健康家犬2只，雌雄不限，体重10～12kg/只，分成二组，一只经舌动脉灌注顺铂(CDDP)20mg+0.9%生理盐水5ml溶液，另一只经舌动脉灌注顺铂—白蛋白微球(CDDP_AMS)147mg（含顺铂20mg）与3ml0.9%生理盐水混悬液，另用2ml生理盐水冲洗空针内残余的微球并灌入。
　　实验材料　牛血清白蛋白微球由华西医科大学药学院药剂教研室研制,直径29～116μm，平均直径56.3μm，40～70μm的微球占总数的82.4％，使用前经钴60照射灭菌。微球中顺铂含量为13.6％（w/w）。
　　实验方法
　　1.顺铂及顺铂白蛋白微球的灌注途径和方法
　　将动物用3％戊巴比妥钠按每公斤体重30mg，行腹腔注射麻醉，颈部备皮，消毒铺巾，于右侧颈部气管旁，从下颌下缘向下作长约5cm的切口，分层解剖出颈总动脉，颈内动脉、颈外动脉、舌动脉，将舌动脉游离约2～3cm，穿缝线两根，固定备用。用12号针头于暴露的舌动脉表面向远心端穿刺，用已备缝线固定针头，外接三通管，推注美兰1ml，待半舌兰染定位准确后，在30KPa压力下，分别于二只狗中推注顺铂20mg+0.9%生理盐水5ml及顺铂—白蛋白微球147mg（含顺铂20mg）+0.9%生理盐水3ml混悬液。推注微球后，通过三通管另取2ml0.9%生理盐水清洗空针内残余微球并推入。拔出穿刺针，于穿刺部位之近远侧分别作舌动脉双线结扎，冲洗伤口，分层缝合。灌注后10、20、30、40、60、90、120、180分钟，1天、3天、5天、7天、10天分别从二只狗外周静脉中各抽取2ml外周静脉血，以备测血药浓度用。
　　2.外周静脉血中血铂含量的测定
　　将各时间点抽取的外周静脉血2ml，转移入烧杯中，残余血液用蒸馏水冲洗并入，加纯硝酸2ml，于80℃下消化72小时，等溶液澄清透明后加蒸馏水定容至10ml，置于美国J—A公司生产ICAP9000型等离子光谱仪上测量（四川联合大学分析测试中心提供），算出每ml全血中所含的铂含量（μg/ml）。仪器工作条件：功率P=1.1kw，观察高度h=16mm,载气流量Qs=0.41(L)/min,温度20±2℃，相对湿度56％。

结果

　　采用等离子光谱仪测定外周静脉血中铂含量（表1）。

表1　灌注后不同时间外周静脉血中铂含量的动态变化结果（μg/ml）
 

将表1数据绘制成曲线，如图1所示。

图1　犬舌动脉灌注CDDP及CDDP—AMS后外周血铂浓度的动态变化

　　从图、表中可知，单纯顺铂灌注后外周静脉血药浓度达峰时tp极短，仅10min,峰值（cmax）为10.42μg/ml，达到峰值后迅速下降，血药消除半衰期t1/2，为2.5750hr，血药消除速率常数（ke）为0.2692，血药平均滞留时间（MRT）为16.6817hr，灌注后三天外周血中基本上已无法测出CDDP浓度。而CDDP—AMS灌注组外周血药浓度上升和下降均较缓慢，达峰时tp90min，峰值Cmax为6.35μg/ml,是CDDP组的60.94％，血药消除半衰期t1/2为96.3653hr，是CDDP组的37.42倍，血药消除速率常数（ke）为0.0072，平均滞留时间MRT为117.7162hr，是CDDP组的7.06倍。利用等离子光谱仪，灌注后10天仍能在外周血中测到一定水平的铂。因此，CDDP—AMS灌注后，CDDP在血中的消除较缓慢，滞留时间较长，能充分被靶组织所利用，可见它具有缓释作用。