【摘要】 目的 深入探讨过度张口对颞下颌关节(TMJ)的损伤特点及其神经生物学机制。方法 在对过度张口的组织病理学实验研究基础上，采用ABC免疫组化法同步观察其TMJ软组织P物质样免疫反应(SPIR)的变化。结果 过度张口主要使关节盘前伸部、双板区和关节囊滑膜下层SPIR显著增强，并随过度张口的延长而加重，去除刺激休息两周后，SPIR明显减弱。SPIR的变化与其组织病理学改变在变化部位、反应程度和治疗效果上基本一致，提示二者间确有某些内在联系。结论 认识变化特点，把握内在联系，将有助于拓展TMJ损伤及疼痛的预防与诊治的思路及方法。
【关键词】 颞下颌关节 P物质 过度张口
研究已证实，P物质(substance P, SP)是初级感觉神经元内的一种神经递质，当组织受到伤害性刺激时，SP一方面向中枢传递伤害信息；一方面从末梢释放，参与局部组织的疼痛和炎症反应［1～3］。下颌过度运动是颞下颌关节(TMJ)和咀嚼肌疼痛的常见原因之一［4］；作者对过度张口的组织病理学实验研究［5］也表明，过度张口对TMJ和咀嚼肌确有损伤，可视为颅颌紊乱症(CMD)的致病因素之一。本研究旨在观察过度张口对TMJ软组织SP样免疫反应(SP-like immunologic reaction, SPIR)的影响，进一步揭示过度张口对TMJ的损伤特点及其疼痛的神经生物学机制，为开拓临床预防和诊治的新思路提供理论依据。
材料和方法
1.实验动物和动物模型及其分组均与其组织病理学实验研究相同［5］。
2.标本制取：小型猪麻醉后，切开并整体取下双侧关节囊、关节盘及盘周软组织，液氮骤冷，-80℃保存。切片前分成内、中、外三块行OCT包埋，恒低温切片，厚30 μm。
3.免疫组化实验：SP抗体由中国医学科学院提供，ABC试剂盒为美国Vector公司产品。按ABC免疫组化方法进行，SP抗体浓度为1∶600。最后行DAB法显色反应，终产物为棕黄色。阴性对照组用Tris-HCl液替代一抗，其余步骤相同。
结果
1.对照组TMJ软组织SPIR的分布：除关节盘中带中部外，TMJ软组织其他部位均有不同程度的阳性反应。关节盘边缘部(图1)、前伸部及盘后组织、盘周附着组织中均可见纤维样阳性反应，其中血管壁、神经纤维及肌梭结构阳性反应较明显；关节囊及滑膜下层可见细小的纤维样阳性反应，滑膜表层阳性反应较少且弱。
2.实验组TMJ软组织SPIR的变化：
(1)A组：关节盘前伸部及双板区神经纤维阳性反应明显增强，滑膜下层阳性反应也较对照组显著(图2)。关节盘前、后带及盘周附着多无明显变化，仅盘周肌肉附着部的肌筋膜出现明显增强的阳性反应。
(2)B组：关节盘前伸部及双板区神经纤维阳性反应增强显著(图3)，血管壁阳性反应也较对照组增强(图4)，双板区阳性反应增多，滑膜下层阳性反应增强较明显。
图1 对照组小型猪关节盘(水平面)盘边缘可见SPIR阳性纤维(×140，ABC法) 图2 实验组A组小型猪关节滑膜(矢状面)SPIR阳性增强，滑膜下层有明显增强的阳性纤维(×350,ABC法) 图3 实验组B组小型猪关节盘前伸部(矢状面)神经纤维横断面，SPIR阳性显著增强(×140，ABC法) 图4 实验组B组小型猪关节盘双板区(水平面)血管壁SPIR阳性增强(×140,ABC法)
(3)C组：关节盘前伸部神经纤维阳性反应仍较强，血管壁已与对照组相似。双板区及关节滑膜的阳性反应明显减弱。关节盘前内侧翼外肌附着部阳性反应仍较明显。
(4)D组：关节盘前伸部及双板区神经纤维和血管壁的阳性反应多数减弱，但程度不一。盘周肌肉附着部的一些细小神经纤维和关节滑膜下层的阳性反应仍较明显。
讨论
一、过度张口TMJ软组织SPIR的变化特点
1.反应部位：阳性反应显著增强的部位主要在关节盘前伸部、双板区和关节囊，符合TMJ神经纤维分布的特点［6］。其中以神经纤维、血管壁及滑膜下层为主要变化标志。
